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2023.11.18新版:ELISA实验的原理总结-金狮贵宾服务生物
2023-12-19
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以下是2023.11.18新版:ELISA实验的原理总结:ELISA即酶联免疫吸附测定,是一类常用的免疫酶技术。主要方法是将已知的抗原或抗体吸附在固相载体表面,然后利用酶标记(偶联)的抗体或抗原与之孵育,加入显色剂显色,通过酶标仪测定待测物颜色与标准物颜色的差异,绘制出酶活曲线得出待测物浓度。一、四种常见ELISA方法:1.直接ELISA将抗原固定于ELISA板上,然后用酶标抗体直检测抗原。相较于其它类型的ELISA实验,直接ELISA实验步骤少,检测速度快,不需要用到二抗,...
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人白细胞介素10(IL-10)ELISA试剂盒的原理和操作方法-金狮贵宾服务生物
2023-12-18
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人白细胞介素10(IL-10)ELISA试剂盒的原理和操作方法检测原理:本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人白细胞介素10(IL-10)水平。用纯化的人白细胞介素10(IL-10)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入人白细胞介素10(IL-10),再与HRP标记的人白细胞介素10(IL-10)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过che底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的...
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ELISA实验各种样本收集及处理方法
2023-12-15
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ELISA实验各种样本收集及处理方法:由于ELISA实验只能检测可溶性蛋白质的含量,因此要求样本应清晰透明并离心除去沉淀物或悬浮物质。为确保实验的准确性,-20℃或-80℃保存的样本应在1-6个月内完成检测,4℃保存的样本在一周内完成检测。此外,样本中不能含有会抑制HRP活性的NaN3,否则会造成假阴性结果。可用于ELISA实验的样本一般有血清、血浆、尿液、细胞培养上清以及组织匀浆等。不同样本类型的预处理方法也不同。适当的样本预处理是确保ELISA实验正确性和准确性的第一步。...
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什么是原代细胞
2023-12-15
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什么是原代细胞原代细胞(primaryculturecell)是指从机体取出后立即培养的细胞。动物组织经胰蛋白酶等消化、分散,获得单个细胞,再生长于培养皿中。大多数组织可以制备原代细胞,但生长的快慢及难易程度不一。肾和睾丸常用,甲状腺细胞生长较慢,只用于某些特定的病毒如猪传染性肠胃炎病毒的培养。组织块培养法1、组织块接种后的前3天,在观察和移动的过程中,注意不要引起液体的振荡。为保证组织块附着于瓶壁上,要避免频繁晃动。2、加入的培养液不宜过多,避免浸泡的组织块受轻微的波动而脱...
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小鼠ELISA试剂盒标本的采取与保存
2023-11-28
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大部分小鼠ELISA试剂盒检测均以血清为标本。1.血清标本可按常规方法采集,应注意避免溶血,红细胞溶解时会释放出具有过氧化物酶活性的物质,以HRP为标记的小鼠ELISA试剂盒测定中,如有细菌污染,菌体中可能含有内源性HRP,也会产生假阳性反应。2.一般说来,在5天内测定的血清标本可放置于4℃,标本在冰箱中保存时间过长导致血清IgG聚合,使间接法的试剂本底加深。3.超过一周测定的需-20℃保存。冻结血清融解后,蛋白质局部浓缩,分布不均,应充分混匀并避免产生气泡。4.混浊或有沉淀...
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ELISA实验操作要点样本的技巧
2023-11-28
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收集整理三类样本的技巧:由于ELISA实验只能检测可溶性蛋白质的含量,因此要求样本应清晰透明并离心除去沉淀物或悬浮物质。为确保实验的准确性,-20℃或-80℃保存的样本应在1-6个月内完成检测,4℃保存的样本在一周内完成检测。此外,样本中不能含有会抑制HRP活性的NaN3,否则会造成假阴性结果。可用于ELISA实验的样本一般有血清、血浆、尿液、细胞培养上清以及组织匀浆等。不同样本类型的预处理方法也不同。适当的样本预处理是确保ELISA实验正确性和准确性的第一步。这里,我们将介...